(En tant que fournisseur de confiance, HANGZHOU JECI BIOCHEM propose une production stable-de haute-NAD (Nicotinamide adénine dinucléotide, CAS 53‑84‑9), fournissant un support fiable en matières premières pour les applications de DIV et d'analyses métaboliques. Notre production constante et notre contrôle qualité rigoureux font de nous un partenaire privilégié pour la fourniture de NAD de qualité diagnostique-.)
Le NAD (nicotinamide adénine dinucléotide) est une coenzyme importante naturellement présente dans les cellules, existant sous deux formes : forme oxydée (NAD⁺) et forme réduite (NADH). Il peut être interconverti via des réactions redox, régulant divers processus biologiques tels que le métabolisme énergétique cellulaire et la transduction du signal. Le NAD participe à des réactions enzymatiques clés pour capturer les modifications des métabolites, et les anomalies des taux de NAD et de NADH ainsi que leurs ratios sont étroitement liés à l'apparition et au développement de nombreuses maladies. Par conséquent, il est devenu un marqueur important pour les tests biochimiques cliniques et le dépistage précoce des maladies. Les produits NAD de qualité diagnostique-de haute-pureté et de haute-stabilité-, en tant que matières premières de base pour les réactifs de diagnostic in vitro (IVD) et les kits de tests métaboliques, jouent un rôle clé dans l'amélioration de la sensibilité de détection et de la fiabilité des résultats.
Historique de développement du diagnostic-Grade NAD
En 1906, Arthur Harden a découvert un « mystérieux facteur coenzyme » qui favorise le métabolisme au cours de son étude de la fermentation alcoolique de la levure (il s'est avéré plus tard qu'il s'agissait du NAD).
En 1929, Hans von Euler-Chelpin a identifié la structure dinucléotidique du NAD.
En 1930, Otto Warburg a élucidé le mécanisme redox entre le NAD et le NADH, précisant que le NADH présente une absorption ultraviolette caractéristique à 340 nm alors que le NAD n'a aucune absorption à cette longueur d'onde, jetant ainsi les bases théoriques des analyses enzymatiques.
En 1948, Horecker et coll. ont confirmé le coefficient d'extinction molaire du NADH à 340 nm, permettant une quantification directe des taux de réaction enzymatique grâce aux changements d'absorbance [1].
En 1961, Oliver H. Lowry a établi la méthode de cycle NAD(P)/H, pionnière dans l'analyse quantitative du NAD(P)/H tissulaire/cellulaire.
De 1962 à 1963, Boehringer Mannheim (acquis plus tard par Roche) a lancé un kit de réactifs basé sur la détection de l'absorbance du NADH à 340 nm pour la lactate déshydrogénase (LDH), réalisant ainsi la première application commerciale du NAD de qualité diagnostique en tant que matière première de coenzyme.
En 1973, Bernofsky et coll. a établi le principe du système d'amplification ADH-PES-MTT (système colorimétrique ADH-PES-MTT) [2] ;同年, Kato et al. (Lowry Laboratory) a développé la méthode de cycle enzymatique double ADH-MDH-, permettant une détection très sensible du NAD/NADH [3].
Depuis lors, le NAD de qualité diagnostique-est devenu une matière première essentielle pour les tests biochimiques de routine et s'est continuellement étendu à des domaines-de pointe tels que la recherche sur les biomarqueurs des maladies neurodégénératives, le suivi du métabolisme tumoral et l'évaluation du vieillissement.
Scénarios d'application NAD de niveau - de diagnostic
Matières premières de base pour le diagnostic biochimique clinique
① Détection de la lactate déshydrogénase (LDH)
Principe de détection:
Lactate+NAD+⟶LDHPyruvate+NADH+H+
Scénarios d'application: Service de Cardiologie (diagnostic d'infarctus aigu du myocarde), Laboratoire Clinique (diagnostic d'anémie hémolytique), Hépatologie (évaluation des lésions des cellules hépatiques), etc.
Plage normale de LDH : 140 - 280 U/L (adultes, des différences existent selon les méthodes)
Importance clinique: > 280 U/L (indique des lésions tissulaires (foie, cœur, rein, muscle, poumon, etc.)), > 500 U/L (généralement observé dans les cas d'infarctus du myocarde, d'anémie hémolytique, de tumeurs malignes, d'infections graves).
② Détection de la malate déshydrogénase (MDH)
Principe de détection:
Acide malique+NAD+⟶MDHAcide oxaloacétique+NADH+H+
Scénarios d'application: Réactifs cliniques (diagnostic des maladies mitochondriales), Domaine de recherche scientifique (recherche sur la fonction mitochondriale), etc.
Plage normale de MDH : 12.5 - 50 U/L (les différents laboratoires présentent de légères différences en raison des méthodes de détection et des réactifs)
Importance clinique: L'élévation indique une lésion mitochondriale, une nécrose tissulaire, etc.
③ Détection de l'isocitrate déshydrogénase (ICDH)
Principe de détection:
Acide isocitrique+NAD+⟶ICDH -Acide cétoglutarique+NADH+H+
Scénarios d'application: Diagnostic clinique des maladies mitochondriales, domaine de recherche scientifique (évaluation des lésions hépatiques, recherche sur le métabolisme énergétique), etc.
Plage normale d'ICDH : 1 - 5 U/L (sérum)
Importance clinique: L'élévation indique une lésion mitochondriale, une lésion hépatocytaire, une nécrose tissulaire, etc.
④Détection de la créatine kinase (CK)
Principe de détection :
Phosphocréatine+ADPGlucose+ATPG-6-P+NAD+⟶CKCréatine+ATP⟶HKG-6-P+ADP⟶G6PDH6PG+NADH
Scénarios d'application : service de cardiologie (infarctus aigu du myocarde, myocardite), service d'orthopédie/urgences (lésion musculaire, rhabdomyolyse), neurologie (myopathie), etc.
Plage normale de CK : Hommes 38 - 174 U/L ; Femmes 26 - 140 U/L (différences entre les méthodes)
Signification clinique : Des niveaux élevés indiquent une lésion du myocarde ou des muscles squelettiques, fréquemment observée dans l'infarctus du myocarde, la myocardite, la rhabdomyolyse, l'exercice intense, etc.
⑤Détection du glucose
Principe de détection :
Glucose+ATPG-6-P+NAD+⟶HKG-6-P+ADP⟶G6PDH6PG+NADH
Scénarios d'application : endocrinologie (diagnostic du diabète et surveillance de la glycémie), service des urgences (coma hypoglycémique, diagnostic d'urgence hyperglycémique), médecine de soins intensifs (surveillance de la glycémie des patients en soins intensifs), etc.
Plage normale de glycémie : à jeun 3.9 - 6.1 mmol/L ; 2 heures après le repas < 7,8 mmol/L
Signification clinique : des niveaux élevés sont observés dans le diabète, l'hyperglycémie de stress ; Des niveaux diminués sont observés en cas d'hypoglycémie, d'insulinome, de maladie hépatique grave, etc.
⑥Détection du lactate
Principe de détection :
Lactate+NAD+⟶LDHPyruvate+NADH+H+
Scénarios d'application : service d'urgence (évaluation du choc/hypoxie tissulaire), soins intensifs (jugement de sauvetage après - de patients critiques), service de cardiologie (insuffisance cardiaque), maladies infectieuses (septicémie), médecine du sport (évaluation de la capacité physique des athlètes), etc.
Plage normale de lactate : 0.5 - 2.2 mmol/L (sang veineux)
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⑦ Détection du galactose
Principe de détection:
-D-Galactose+NAD+⟶GalDHAcide galactonique+NADH+H+
Scénarios d'application: Dépistage néonatal (Diagnostic de la galactosémie), Pédiatrie (Erreurs innées du métabolisme), Gastro-entérologie (Identification de l'intolérance au lactose), Hépatologie (Évaluation de la fonction hépatique), etc.
Plage normale de galactose: Sérum à jeun : < 0,28 mmol/L ; Nouveau-nés : < 1,11 mmol/L
Importance clinique: Des taux élevés sont observés dans la galactosémie, l'insuffisance hépatique, le déficit congénital en enzymes métaboliques du galactose, etc.
⑧ Détection d'éthanol
Principe de détection:
Éthanol+NAD+⟶ADHAcétaldéhyde+NADH+H+
Scénarios d'application: Service d'urgence (diagnostic d'intoxication alcoolique aiguë), centre d'examen physique (alcootest du conducteur), identification médico-légale (mesure de la concentration d'alcool dans le sang), etc.
Plage normale d'éthanol: 0 mmol/L (Non-buveurs)
Importance clinique: Des niveaux élevés indiquent une consommation d'alcool ou une intoxication alcoolique ; des concentrations excessivement élevées peuvent entraîner une dépression du système nerveux central et une inhibition respiratoire et circulatoire.
⑨ -Détection d'hydroxybutyrate
Principe de détection:
-Acide hydroxybutyrique+NAD+⟶ -HBDHAcide acétoacétique+NADH+H+
Scénarios d'application: Endocrinologie (Diagnostic de l'acidocétose diabétique), Nutrition (Suivi des apports alimentaires), etc.
Plage normale de -hydroxybutyrate: Sang à jeun : < 0,27 mmol/L (Différences entre les méthodes)
Importance clinique : Des niveaux élevés indiquent une acidocétose diabétique, la famine, un jeûne à long terme-, une acidocétose alcoolique, etc.
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⑨ -Détection de l'acide hydroxybutyrique
Principe de détection:
-Acide hydroxybutyrique+NAD+⟶ -HBDHAcide acétoacétique+NADH+H+
Scénarios d'application: Endocrinologie (Diagnostic de l'acidocétose diabétique), Nutrition (Suivi de l'alimentation), etc.
Plage normale de -acide hydroxybutyrique: Sang à jeun : < 0,27 mmol/L (Différences entre les méthodes)
Importance clinique : Des niveaux élevés indiquent une acidocétose diabétique, la famine, un jeûne à long-terme, une cétose alcoolique, etc.
Biomarqueurs pour l'évaluation des maladies
Le NAD, en tant que biomarqueur pour l’évaluation de la maladie, est actuellement au stade de la traduction clinique. En 2022, le kit de détection Q-NADMED Blood NAD⁺/NADH de NADMED est devenu le premier produit de détection NAD au monde à obtenir la certification CE-IVD (In Vitro Diagnostic Medical Devices Directive). Il détecte les concentrations de NAD⁺ et NADH dans le sang total humain, avec des limites de détection du NAD⁺ : 330 nM ; NADH : 119 nM. La concentration de NAD⁺ dans le sang total d'adultes en bonne santé est d'environ 18 μM (plage : 15 à 23 μM) [4], utilisée pour la détection quantitative du sang total et la surveillance des effets thérapeutiques des précurseurs du NAD. Cependant, il n’a pas encore été approuvé comme critère diagnostique indépendant de la maladie.
Dans le domaine de la recherche scientifique, la valeur potentielle du rapport NAD/NADH dans le liquide céphalo-rachidien ou le sang dans les maladies neurodégénératives (par exemple, la maladie d'Alzheimer, la maladie de Parkinson), le métabolisme tumoral et l'évaluation du vieillissement est étudiée en profondeur [5−8], mais il est actuellement principalement appliqué dans les essais cliniques et l'exploration de la recherche scientifique, plutôt que dans le diagnostic clinique de routine.
>Paysage du marché du NAD de qualité-de diagnostic<
Actuellement, le marché mondial du NAD-de qualité diagnostique se trouve dans une phase de développement rapide, motivé par la croissance de la technologie et de la demande. L'industrie passe rapidement d'une domination des importations-à une substitution nationale. Le domaine du diagnostic in vitro présente une différenciation structurelle : bien que le nombre total de kits de réactifs ait diminué, les grandes entreprises (par exemple, Roche Diagnostics, Mindray Medical) restent stables et se lancent dans de nouveaux projets tels que les tests métaboliques et l'évaluation du vieillissement, tandis que les petites et moyennes entreprises-réduisent leurs lignes de production en raison de la pression sur les bénéfices.
Les principaux fournisseurs de NAD-de qualité diagnostique sont : Roche, Oriental Yeast, SunClone Bio, Shenzhen Bangtai, etc.
Références
[1] HORECKER BL, KORNBERG A. Les coefficients d'extinction de la bande réduite des nucléotides pyridine[J]. J Biol Chem, 1948, 175(1) : 385 - 90.
[2] BENFORSKY C, SWAN M. Un test de cyclage amélioré pour le nicotinamide adénine dinucléotide [J]. Anal Biochimie, 1973, 53(2) : 452 - 8.
[3] KATO T, BERNTSEN O, CARTER S et al. Une méthode de cycle enzymatique pour le nicotinamide - adénine dinucléotide avec des déshydrogénases maliques et alcooliques [J]. Anal Biochimie, 1973, 56(2) : 392 - 8.
[4] NATALIA V Balshova, Lev G Zavileysky, Artem V Artukhov, et al. Test efficace et importance des marqueurs du NAD⁺ dans le sang humain [J]. Front Med, 2022, 9, 886645.
[5] LAN Z P. Un nouveau système de détection de biomarqueurs et son application en Chine [Brevet]. Chine, 119560018A[P]. 2024 - 11 - 12.
[6] YAN L, SUN MR, WU J et al. Un type de sonde fluorescente pour détecter les nucléosides de pyrimidine, sa méthode de préparation et son application : Chine, 117887460A[P]. 2025 - 09 - 02.
[7] JIN LP, ZHAO X, LU Y et al. Détermination chromogénique du nicotinamide adénine dinucléotide et de ses métabolites utilisant des nucléosides de pyridine comme cofacteurs et son application dans le diagnostic ou le traitement des fluides fermentaires [J]. Chine, 112694070A[P]. 2023 - 12 - 22.
[8] HONG J, HAN ZW, NING XQ et al. Application du NAD⁺ comme marqueur moléculaire pour le développement personnalisé de produits permettant de diagnostiquer l'inconfort des organes génitaux féminins [J]. Chine, 118109777A[P]. 2024 - 05 - 10.